biological source
rabbit
Quality Level
antibody form
serum
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
species reactivity
yeast, Saccharomyces cerevisiae, human
species reactivity (predicted by homology)
vertebrates (most common)
manufacturer/tradename
Upstate®
technique(s)
ChIP: suitable (ChIP-seq), dot blot: suitable, western blot: suitable
NCBI accession no.
UniProt accession no.
shipped in
dry ice
target post-translational modification
acetylation (Lys18)
Gene Information
human ... H3C1(8350)
General description
组蛋白H3是参与真核细胞染色质结构的5种主要组蛋白之一。H3具有一个主要的球状结构域和一个长N末端的尾巴,其与核糖体核小体′串珠′结构体的结构有关。
组蛋白H3的乙酰化发生在组蛋白尾部的几个不同的赖氨酸位置,并由称为组蛋白乙酰基转移酶(HATs)的酶家族完成。
组蛋白H3的乙酰化发生在组蛋白尾部的几个不同的赖氨酸位置,并由称为组蛋白乙酰基转移酶(HATs)的酶家族完成。
17 kDa
Immunogen
KLH缀合的合成肽(GKAPRAcKQLASK-C),对应于在赖氨酸18上乙酰化的酵母组蛋白H3的氨基酸13-23,并添加了C端半胱氨酸便于进行缀合。
Application
使用在ChIP,WB中验证的抗乙酰基-组蛋白H3(Lys18)抗体(兔多克隆抗体)检测乙酰基-组蛋白H3(Lys18),也称为H3K18Ac,组蛋白H3(乙酰化K18)。
染色质免疫沉淀:
代表性批次数据。
使用2 µL正常兔血清或2 µL抗乙酰化组蛋白H3(Lys18)和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610),对从HeLa细胞制备的超声染色质(每IP 1 X 10e6细胞当量)进行染色质免疫沉淀。 使用对人GAPDH启动子区域特异的对照引物作为阳性基因座,并使用β-珠蛋白引物作为阴性基因座,通过qPCR验证了乙酰基组蛋白H3(Lys18)相关DNA片段的成功免疫沉淀。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅EZ-Magna ChIP A(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)协议以获取实验详细信息。
ChIP测序:
代表性批次数据。使用Magna ChIP HiSens试剂盒(目录号17-10460),2 μL抗乙酰化组蛋白H3(Lys18)抗体(目录号07-354),20 µL蛋白A/G珠和1e6交联 HeLa细胞染色质进行染色质免疫沉淀,然后使用磁珠进行DNA纯化。使用标准规程从Input和ChIP DNA样品制备文库,带Illumina条形码适配器,并在Illumina HiSeq仪器上进行分析。在去除 TagDust(http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource)标签后,使用 Bowtie(http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml)映射了FastQ文件中的超过1000万次读取。使用 MACS(http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/)识别峰,并从 BigWig 和 BED 文件在 UCSC Genome Browser(http://genome.ucsc.edu)中以自定义轨道的形式显示峰和读数。
蛋白质印迹分析:
代表性批次数据。
用抗乙酰基组蛋白H3(Lys18)(1:10,000稀释度)探测重组组蛋白H3(泳道1,目录号14-494)以及丁酸钠处理(泳道2)和未处理(泳道3)HeLa细胞(目录号17-305)的酸提取物。
箭头表示乙酰基组蛋白H3(Lys18)(17 kDa)。
斑点印迹:
代表性批次数据。
将40 ng和4 ng量的不同修饰的组蛋白肽(见表1)转移至PVDF膜上,并用抗乙酰基组蛋白H3(Lys18)抗体(1:5000稀释度)进行探测。使用与HRP偶联的山羊抗兔IgG和化学发光检测系统可视化蛋白质。显示了60秒曝光的图像。
代表性批次数据。
使用2 µL正常兔血清或2 µL抗乙酰化组蛋白H3(Lys18)和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610),对从HeLa细胞制备的超声染色质(每IP 1 X 10e6细胞当量)进行染色质免疫沉淀。 使用对人GAPDH启动子区域特异的对照引物作为阳性基因座,并使用β-珠蛋白引物作为阴性基因座,通过qPCR验证了乙酰基组蛋白H3(Lys18)相关DNA片段的成功免疫沉淀。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅EZ-Magna ChIP A(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)协议以获取实验详细信息。
ChIP测序:
代表性批次数据。使用Magna ChIP HiSens试剂盒(目录号17-10460),2 μL抗乙酰化组蛋白H3(Lys18)抗体(目录号07-354),20 µL蛋白A/G珠和1e6交联 HeLa细胞染色质进行染色质免疫沉淀,然后使用磁珠进行DNA纯化。使用标准规程从Input和ChIP DNA样品制备文库,带Illumina条形码适配器,并在Illumina HiSeq仪器上进行分析。在去除 TagDust(http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource)标签后,使用 Bowtie(http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml)映射了FastQ文件中的超过1000万次读取。使用 MACS(http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/)识别峰,并从 BigWig 和 BED 文件在 UCSC Genome Browser(http://genome.ucsc.edu)中以自定义轨道的形式显示峰和读数。
蛋白质印迹分析:
代表性批次数据。
用抗乙酰基组蛋白H3(Lys18)(1:10,000稀释度)探测重组组蛋白H3(泳道1,目录号14-494)以及丁酸钠处理(泳道2)和未处理(泳道3)HeLa细胞(目录号17-305)的酸提取物。
箭头表示乙酰基组蛋白H3(Lys18)(17 kDa)。
斑点印迹:
代表性批次数据。
将40 ng和4 ng量的不同修饰的组蛋白肽(见表1)转移至PVDF膜上,并用抗乙酰基组蛋白H3(Lys18)抗体(1:5000稀释度)进行探测。使用与HRP偶联的山羊抗兔IgG和化学发光检测系统可视化蛋白质。显示了60秒曝光的图像。
Biochem/physiol Actions
识别赖氨酸18乙酰化的组蛋白H3。
Physical form
含有0.05%叠氮化钠和30%甘油的100 μL兔血清。
Analysis Note
通过免疫印迹法对丁酸钠处理过的HeLa细胞的酸提取物进行了常规评估
Other Notes
替代:04-1107
浓度:请参考批次特异性浓缩物的分析证书。
Legal Information
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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存储类别
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Promoter-dependent roles for the Srb10 cyclin-dependent kinase and the Hda1 deacetylase in Tup1-mediated repression in Saccharomyces cerevisiae.
Green, SR; Johnson, AD
Molecular Biology of the Cell null
Inducible activation of Cre recombinase in adult mice causes gastric epithelial atrophy, metaplasia and regenerative changes in the absence of "floxed" alleles.
Huh WJ, Mysorekar IU, Mills JC
American Journal of Physiology: Gastrointestinal and Liver Physiology null
Sean L Beckwith et al.
PLoS genetics, 14(2), e1007216-e1007216 (2018-02-21)
Chromatin remodeling complexes are essential for gene expression programs that coordinate cell function with metabolic status. However, how these remodelers are integrated in metabolic stability pathways is not well known. Here, we report an expansive genetic screen with chromatin remodelers
全球贸易项目编号
| 货号 | GTIN |
|---|---|
| 07-354 | 04053252620645 |