usage
sufficient for 2 x 10 labeling reactions
packaging
kit of 1 (12 components)
manufacturer/tradename
Roche
greener alternative product characteristics
Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.
sustainability
Greener Alternative Product
technique(s)
Northern blotting: suitable, Southern blotting: suitable, hybridization: suitable
greener alternative category
, Aligned
storage temp.
−20°C
General description
样品材料
- 线性化质粒DNA
- PCR产物
DIG RNA标记试剂盒可产生已知长度的DIG标记单链RNA 探针。SP6或T7 RNA聚合酶都可在体外对来自模板DNA（在地高辛-UTP存在情况下）对这些探针进行转录。
RNA标记通过体外转录完成
待转录的DNA被克隆至含有SP6及T7 RNA聚合酶的合适转录载体的多接头位点（如pSPT 18或19）。相邻的模板DNA在合适的位点进行线性化而RNA聚合酶用于生成“流失的”转录本。DIG-UTP被插入至转录本中。新合成RNA的每个第20至25个核苷酸都是DIG-UTP。由于核苷酸的浓度在标准转录反应中并不会成为限制，该反应可生成大量的标记RNA。
Application
- Northern blots
- Southern blots
- 原位杂交
- 菌斑或克隆提升
- RNase保护试验
注意：由于DIG和UTP之间的连接对于碱具有抗性，DIG标记的RNA可通过碱处理进行片段化。略微降低DIG标记的RNA探针的大小可能会使其更为适合于原位杂交中的特定应用。
Biochem/physiol Actions
DIG标记的RNA探针可在最低至1 μg的哺乳动物DNA中按照以下的检测条件进行单拷贝基因的检测：该杂交混合液包含20至100 ng标记探针/ml，而结合的探针可通过抗DIG-AP进行检测并通过化学发光底物CDP-Star进行可视化。
热灭活：添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 终止反应。
Packaging
Analysis Note
Other Notes
仅试剂盒组分
- pSPT18 DNA 0.25 mg/ml
- pSPT19 DNA 0.25 mg/ml
- Control DNA 1, pSPT18-Neo, cleaved with Pvu II 0.25 mg/ml
- Control DNA 2, pSPT19-Neo, cleaved with Pvu II 0.25 mg/ml
- DIG-labeled Control RNA, DIG-labeled "antisense" neo RNA 100 ng/µl
- Unlabeled Control RNA, neo poly (A) "sense" RNA 200 µg/ml
- NTP Labeling Mixture 10x concentrated
signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
Acute Tox. 4 Oral - Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1
存储类别
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 2
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
法规信息
此项目有
实验方案
在μg级测定标记效率（标准标记反应的预计产量为每μg 线性模板DNA经过DIG RNA标记反应后可得到20 μg的DIG标记RNA）
Determine the labeling efficiency in terms of μg (expected yield of a standard labeling reaction is 20 μg of DIG labeled RNA per μg linearized template DNA after the DIG RNA labeling reaction).
商品
地高辛（DIG）标记方法和试剂盒适用于DNA和RNA DIG探针、随机引物DNA标记、切口平移标记、5'和3'寡核苷酸末端标记。
Digoxigenin (DIG) labeling methods and kits for DNA and RNA DIG probes, random primed DNA labeling, nick translation labeling, 5’ and 3’ oligonucleotide end-labeling.
全球贸易项目编号
| 货号 | GTIN |
|---|---|
| 11175025910 | 04061837902048 |