form
solution
usage
sufficient for 20 reactions
packaging
pkg of 40 μL
manufacturer/tradename
Roche
impurities
Ribonuclease, none detected (up to 20 µl using MSII-RNA)
color
colorless
solubility
water: miscible
storage temp.
−20°C
General description
标记效率：来自1μg 线性模板DNA的约10μg的全长地高辛标记RNA被转录。
检测时间：135分钟
样本材料
线性化质粒DNA：
待转录的DNA将会被克隆至含有SP6，T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于“流失”转录本的合成，质粒是通过限制性酶进行线性化的。限制性酶生成的5′-突出应当被使用；3′ 突出应当被避免。线性化的模板DNA应当通过酚氯仿抽提及乙醇沉淀进行纯化，以避免RNase的污染。对于′run around′转录环状质粒DNA会被使用。
PCR产物：
含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段也可被用作转录的模板。推荐在转录之前对PCR片段使用HIghPure柱进行纯化。
检测时间：135分钟
样本材料
线性化质粒DNA：
待转录的DNA将会被克隆至含有SP6，T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于“流失”转录本的合成，质粒是通过限制性酶进行线性化的。限制性酶生成的5′-突出应当被使用；3′ 突出应当被避免。线性化的模板DNA应当通过酚氯仿抽提及乙醇沉淀进行纯化，以避免RNase的污染。对于′run around′转录环状质粒DNA会被使用。
PCR产物：
含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段也可被用作转录的模板。推荐在转录之前对PCR片段使用HIghPure柱进行纯化。
通过这种方法，特定长度的DIG标记单链RNA探针通过体外转录被生成。在标准条件下，DIG-11-UTP通过SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大约每20到25个核苷酸的间隔插入转录产物中。DIG RNA标记混合物专门设计用于优化转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA标记
内含物
10x 溶液带有：10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA标记
内含物
10x 溶液带有：10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.
Application
利用SP6，T7及T3 RNA聚合酶通过体外转录而使用地高辛-11-UTP进行RNA标记。DIG标记RNA已用于多种杂交技术：
- Northern blots
- Southern blots
- 斑点印迹
- 菌斑或克隆提升
- RNase保护实验
- 染色体, 细胞, 及组织切片原位
Biochem/physiol Actions
热灭活：添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 终止反应。
Features and Benefits
DIG RNA标记混合物专门设计用于来自Roche并配以优化的转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
Analysis Note
经DIG RNA标记试剂盒和DIG核酸检测试剂盒检测的功能。
Other Notes
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
Acute Tox. 4 Oral
存储类别
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
实验方案
Determine the labeling efficiency in terms of μg (expected yield of a standard labeling reaction is 20 μg of DIG labeled RNA per μg linearized template DNA after the DIG RNA labeling reaction).
商品
地高辛（DIG）标记方法和试剂盒适用于DNA和RNA DIG探针、随机引物DNA标记、切口平移标记、5'和3'寡核苷酸末端标记。
Digoxigenin (DIG) labeling methods and kits for DNA and RNA DIG probes, random primed DNA labeling, nick translation labeling, 5’ and 3’ oligonucleotide end-labeling.
Marco Nousch et al.
Journal of cell science, 126(Pt 18), 4274-4285 (2013-07-12)
Post-transcriptional regulatory mechanisms are widely used to control gene expression programs of tissue development and physiology. Controlled 3' poly(A) tail-length changes of mRNAs provide a mechanistic basis of such regulation, affecting mRNA stability and translational competence. Deadenylases are a conserved
Nathalie Bessodes et al.
PLoS genetics, 8(12), e1003121-e1003121 (2012-12-29)
During echinoderm development, expression of nodal on the right side plays a crucial role in positioning of the rudiment on the left side, but the mechanisms that restrict nodal expression to the right side are not known. Here we show
Ryan B MacDonald et al.
Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists, 239(8), 2298-2306 (2010-07-27)
The Dlx genes encode a family of transcription factors important for the development of the vertebrate forebrain. These genes have very similar expression domains during the development of the telencephalon in mice and play a role in gamma-aminobutyric acid (GABAergic)
全球贸易项目编号
| 货号 | GTIN |
|---|---|
| 11277073910 | 04061837902086 |