白色念球菌中的蛋白酶K

纯化无DNA蛋白酶K SAE0151已经过严格的质量控制测试，以确保通过35个循环对16S和18S rDNA（使用通用引物对）进行PCR扩增时，不存在可检测水平的污染DNA。

蛋白酶K是一种稳定的丝氨酸蛋白酶，具有广泛的底物特异性。即使在存在去污剂的情况下，它也会以天然状态降解许多蛋白质。从能够在角蛋白上生长的真菌中分离出蛋白酶K，该酶可以消化天然角蛋白。该酶属于具有活性位点催化三联体（Asp39-His69-Ser224）的枯草杆菌蛋白酶家族。
裂解的主要位点是与具有封闭α氨基的脂肪族和芳香族氨基酸的羧基相邻的肽键。它因其广泛的特异性而被广泛使用。蛋白酶K通常通过随后的苯酚提取而变性。

近年来，通过广泛采用与培养无关的分析技术（例如16S rRNA基因测序和宏基因组学），微生物群落的研究发生了彻底变化。由于样品制备过程中的DNA污染是这些基于序列的方法的主要问题，因此不含DNA污染的DNA提取试剂至关重要。

在分离DNA和RNA的过程中，对核酸酶的蛋白水解失活起作用。

在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。

蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp³⁹-His⁶⁹-Ser²²⁴)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂（SDS）以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

纯化的不含DNA的蛋白酶K SAE0151经过严格的质量控制测试，以确保其将不含DNA污染物，适用于微生物组研究。

蛋白酶K在1%Triton X-100和0.5%（w/v）SDS中具有活性。SDS和尿素会使蛋白质底物变性，导致消化速率增加。这些试剂使蛋白酶K本身更慢地变性。

在pH 7.5，37℃条件下，一单位的酶每分钟将水解尿素变性的血红蛋白以产生与1.0 μmol酪氨酸等同的颜色（Folin-Ciocalteu试剂提供的颜色）。