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Merck
CN

LIG1

DNA连接试剂盒

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关于此项目

NACRES:
NA.53
UNSPSC Code:
12352204
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grade

Molecular Biology

Quality Level

usage

1 kit sufficient for 150 ligation reactions

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

General description

Sigma 的 DNA 连接试剂盒包含进行 DNA 连接反应所需的所有试剂。粘性末端连接比平末端连接更有效。加入 PEG 可促进这些反应。

Application

适用于:
  • 将 DNA 片段连接到克隆载体中
  • 诱变
  • 基因分析与结构功能关系

Biochem/physiol Actions

克隆过程中最重要的步骤之一是将线性 DNA 连接到克隆载体中。在缓冲液、ATP 和 DNA 连接酶的存在下,通过将 DNA 片段与适当线性化的克隆载体孵育可进行 DNA 连接。插入物与载体的相对比例、DNA 末端的质量和类型、连接温度和 DNA 浓度等多种参数会影响连接。

Other Notes

足以进行 150 次反应:
  • 在 250 mM Tris-HCl(pH 7.8),100 mM MgCl2 和 10 mM 二硫苏糖醇中的 300uL 10X 连接缓冲液(D2176)
  • 含有 3 x 100 单位 T4 DNA 连接酶(D2886),10 mM Tris-HCl,pH 7.5,50 mM KCl 和 1 mM 二硫苏糖醇的 50% 甘油溶液
  • 3 x 100 uL 10 mM ATP(A3702)
  • 50μL 对照 pBR322 DNA,HAE III Digest(D9430)浓度为 0.5 ug/ul,溶于 10 mM Tris-HCl(pH 8.0)和 1 mM EDTA 中
  • 1.5 mL 24%(w/v)PEG 溶液,(P 2454)
  • 1.5 mL 分子生物学级水(W4502)


存储类别

10 - Combustible liquids

wgk

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

hcodes

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1

法规信息

常规特殊物品

此项目有



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实验方案

Cloning process, joining linear DNA into a vector, is crucial for biotechnological experiments, enabling DNA fragment recombinant technology.


Sambrook, J., et al
Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2, 1-1 (1989)
Ausubel, F. M.
Current Protocols in Molecular Biology, 1, 3-3 (1994)
Bradley J Eckelmann et al.
NAR cancer, 2(3), zcaa013-zcaa013 (2020-08-11)
Homologous recombination/end joining (HR/HEJ)-deficient cancers with BRCA mutations utilize alternative DNA double-strand break repair pathways, particularly alternative non-homologous end joining or microhomology-mediated end joining (alt-EJ/MMEJ) during S and G2 cell cycle phases. Depletion of alt-EJ factors, including XRCC1, PARP1 and



全球贸易项目编号

货号GTIN
APREST82550-100UL04061835842766
HPA048071-25UL04061841229773
HPA041431-100UL04061836326272
AV54307-100UL04061836205683
HPA041431-25UL04061841563747
HPA048071-100UL04061831727210
SAB2501284-100UG04061835791569
WH0003978M1-100UG04061831634136
LIG1-1KT04061833967218
EHU153921-20UG04061831366884
EMU072751-20UG04061828482016
EMU072751-50UG04061828256723
EHU153921-50UG04061828409938